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蘭花育種方法

育種方法及其實驗技術
基因轉型
1. Electroporation 電穿孔法
高壓脈衝下,細胞膜出現短暫、可逆性的開放小孔,可導入外源DNA分子,應用於植物原生質體、植物細胞。
 優點:可迅速有效地轉基因,適用於瞬時表現的研究
 缺點:電激儀價錢昂貴,且電穿孔法依賴原生質體的培養、再生,在應用方面上有一定的侷限性。
 *以裸露的原生質體做為受體材料,必須在建立可靠高效率的原生質體再生系
  統的前提下應用,但許多禾穀類作物,其原生質體培養及再生很困難,轉型頻率低。


2. PEG介導
在二價陽離子(Mg2+、Ca2+)的存在下,PEG(聚乙二醇)與DNA分子形成共沉澱,接著被原生質體吸收。
 優點:實驗成本低廉,結果較穩定,不形成嵌合體,有較好的重複性,且不需要特別的儀器。
 缺點:也是以原生質體作為材料,應用範圍受到很大的限制。

3. liposome介導
將外源DNA包裝於脂質中,透過liposome與原生質體的共保溫培養,可使兩者的脂膜動態結合,外源DNA便釋放入原生質體中。
 優點:1987年,美國科學家合成了lipofectin,轉型水稻提高了轉型頻率,由於有商品出售,簡化了實驗程序。
 缺點:以原生質體作為受體材料。



 *上述三項方法皆以原生質體作為受體材料

優點:植物細胞原生質體可以再生出完整植株,因而去掉了細胞壁,消除了DNA轉型的大障礙,此外可大量操作,也打破了Agrobacterium的宿主範圍限制。
缺點:植物原生質體的分離與培養難度較大,尤其以禾本科為最。另外,過較長時期的細胞培養,遺傳背景可發生變化,以不育為最。



4. Agrobacterium
以農稈菌為載體,將外源基因置於Ti plasmid中,當農稈菌成染植物細胞此段基因可轉移到植物的基因組裡,並穩定地遺傳給後代。
 優點:a. 是自然界中天然發生的完美的基因轉型
    b. 成功率高,效果好,方法也是最成熟的,應用廣
    c. 可容許相當大的DNA片段插入,大於等於50kb
    d. T-DNA上含有引導DNA轉移,整合的序列,及能被高等植物細胞識別的promoter、translation signal
    e. 接入的外源基因可依不同的需要,連接司的promoter
    f. 此種方式,外源基因多以one copy插入,遺傳穩定性好。
 缺點:農稈菌侵染的寄主,主要限於雙子葉植物,加上一些少數單子葉植物,大多數單子葉植物,包括重要禾穀類作物,對農稈菌不敏感,限制了應用範圍

5. Gene Gun
質體DNA先沉澱在微彈(金屬粒子,例如:鎢粉、金粉)表面,利用火藥爆炸,高壓放電或高壓氣體作為驅動力,加速金屬粒子,使其進入植物細胞,隨後釋放出DNA分子,隨機整合到植物的基因組內。
 優點:易於重覆,沒有基因型的依賴性,在禾穀類作物中得到廣泛的應用。
 缺點:a. 此種轉型方法,外源DNA插入genome是隨機的,於是產生了定點整合的問題,有待解決。
    b. 插入位置不同,可能影響到外源DNA的表現,或原株性狀突變。

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蔬菜對溫度日照條件的要求

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全日照  8個小時日照 瓜類、茄果類、豆類、山藥、豆薯(地瓜)。番茄、黃瓜、茄子、辣椒等喜溫中、強光性
蔬菜夏秋季生產,玉米、青椒、西瓜、南瓜、西紅柿、茄子、芝麻、向日葵類。
其次是根莖類,如:馬鈴薯、甜菜、胡蘿蔔、白蘿蔔、甘藷、山藥等等。至少需半日照,才能生長,芋頭雖喜歡全日照,但比其他蔬菜耐蔭。 
需要中等光照大白菜、甘藍、芥菜、蒜、洋蔥。 

長日性蔬菜白菜、甘藍、芥菜、蘿蔔、胡蘿蔔、芹菜、菠菜、萵苣、蠶豆、豌豆、大蔥、洋蔥。

短日性蔬菜豇豆、扁豆、莧菜、空心菜。         

中光性蔬菜黃瓜、番茄、茄子、辣椒、菜豆

菜豆

菜豆喜溫暖,不耐高溫和霜凍。菜豆種子發芽的適溫為20-30℃;在40℃以上的高溫和10℃以下的低溫,種子不易發芽。幼苗生長適宜氣溫為18-25℃。花芽分化的適宜氣溫為20-25℃,過高或過低溫度易出現發育不完全的花蕾、落花。

菜豆對光照強度的要求較高。在適宜溫度條件下,光照充足則植株生長健壯,莖的節間短而分枝多,開花結莢比較多,而且有利於根部對磷肥的吸收。當光照強度減弱時,植株易徒長,莖的節間長,分枝少,葉質薄,而且開花結莢數少,易落花落莢。

菜豆根系強大,能耐一定程度乾旱,但喜中度濕潤土壤條件,要求水分供應適中,不耐澇。生長期適宜土壤濕度為田間最大持水量的60%-70%,空氣相對濕度以80%為宜。開花結莢期對水分最敏感,此期土壤乾旱對開花結莢有不良影響,開花數、結莢數及莢內種子數減少。土壤水分過大時,下部葉片黃化,早脫落。空氣濕度過大會引起徒長、結莢不良。

菜豆具有深根性和根瘤菌,對土壤的要求不甚嚴格,但仍以土層深厚肥沃、排水良好的輕砂壤土或粘質壤土為好。土壤過於粘重、低溫、排水和通氣不良則生長不良,炭疽病重。菜豆喜中性至微酸性土壤,適宜的土壤pH為5-7.0,其中以州6.2-6.8最適宜。菜豆最忌連作,生產中應實行2-3年輪作。

菜豆生育過程中,主要吸收鉀和氮較多,還要吸收一定量的磷和鈣,才能良好發育。結莢期吸收磷鉀量較大。磷鉀肥對菜豆植株的生長發育、根瘤菌的發育、花芽分化、開花結莢和種子的發育等均有影響。缺乏磷肥,菜豆嫩莢和種子的品質和產量就會降低。缺鈣,幼葉葉片捲曲,葉緣失綠和生長點死亡。缺硼,則根係不發達,影響根瘤菌固氮,使花和豆莢發育不良。 耐陰半陰(大概3-4小時日照) 應選擇耐陰的蔬菜種植,如萵…

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錦鯉養殖基本知識

◎飼養與管理的重點 只要不是劇烈的變化,錦鯉很容易適應各水溫水質等環境的變化。並不是沒有大庭園就無法飼養,有人甚至在二樓陽台或頂樓陽台造水池飼養。然而我們是欣賞錦鯉雄壯豪邁之氣,因此水池盡量寬闊為宜,以水深1.2m以上為理想。魚池必須有底水排出,過濾循環等設備。用水不一定要取地下水,自來水也可以飼養。
<因為都市中有景觀安全的需求,及屋頂花園有荷重的需求,錦鯉池水深可以低到30cm左右。>
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<如果溶氧不足,可以優先把打氣設備放置到生化過濾槽中。>
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B、硝酸,亞硝酸的濃度增高時,會影響溶氧量。所以優先去除硝酸及亞硝酸。
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<沸石再生法,是將沸石浸泡25℃以上1:10食鹽水數小時,再以清水洗淨即可。>
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